±
DE) de hemoglobina (Hb), hematócrito (Hto) y hierro (Fe) en plasma de
ratas suplementadas con hierro con polvo seco de Cassia grandis L. o sin él
(inicio y al final de los 15 días de tratamiento)Centro de Investigación y Desarrollo de Medicamentos
Juana Tillán Capó,1
Jorge Rodríguez Chanfrau,2 Juan
Miguel Gómez Mirabal,3 Zenia
Pardo Ruíz3 y Sara Agüero
Fernández4
La población de la zona oriental de Cuba refiere los efectos beneficiosos
del uso tradicional de la Cassia grandis L. en la anemia, con la utilización
del polvo seco obtenido del fruto como un suplemento nutricional. El objetivo
fue evaluar dicho efecto en un modelo experimental de anemia ferropénica
en ratas, inducido por sucesivas extracciones de sangre y administración
de una dieta carente de hierro. Todos los animales fueron sometidos durante
15 días a una dieta semisintética deficiente en hierro y a extracciones
de sangre 3 veces por semana hasta lograr concentraciones de hemoglobina en
sangre menores de 9 g/dL. Se formaron 3 grupos y se mantuvo la misma dieta:
grupo I sin suplementar, grupo II suplementado con 15 mg de hierro/kg de dieta
y grupo III la misma cantidad de hierro más 750 mg/kg de peso corporal
de polvo seco de Cassia grandis L. durante otros 15 días. Al finalizar
se determinaron las concentraciones de hierro, hemoglobina y hematócrito
en sangre. Las concentraciones medias de hemoglobina al cabo de los 15 días
de tratamiento fueron significativamente diferentes en los 3 grupos experimentales,
con resultados mayores en el grupo suplementado con hierro y Cassia grandis
L.; también en este grupo se observó un incremento significativo
de los valores medios de hierro en plasma en relación con los valores
obtenidos en los animales no suplementados y en los animales que recibieron
solamente hierro en la dieta. El porcentaje de hematócrito no mostró
diferencia significativa entre tratamiento. Los resultados corroboran el uso
popular y tradicional de la Cassia grandis L. en los estados anémicos,
al mejorar la utilización del hiero y la producción de hemoglobina.
Palabras clave: Cassia grandis L., ratas, anemia, hemoglobina, hierro, modelo animal.
Se denomina anemia a la disminución del número de eritrocitos,
del volumen globular o de la concentración de hemoglobina en la sangre.1
La anemia ferropénica está causada fundamentalmente por una deficiencia
nutricional de hierro, la cual puede obedecer a un aporte inadecuado, defectuosa
absorción, aumento de las necesidades y pérdidas excesivas de
este metal; pudiendo existir una suma de varios de estos factores.2
Se presenta frecuentemente en el embarazo, aun hasta en los países desarrollados
se reporta una gran incidencia de anemia en la población por un déficit
nutricional de hierro en los alimentos que normalmente se consumen. La administración
de sales orales de gluconato o sulfato ferroso en pacientes anémicos
ha mostrado una gran efectividad, aunque ocasionalmente ha sido asociada con
intolerancia y reacciones en el tracto gastrointestinal.1,
2
Uno de los objetivos de investigación de nuestro centro ha sido la búsqueda
de suplementos nutricionales a partir de fuentes naturales que contribuyan a
un mejoramiento de la alimentación y la salud de la población.
Cassia grandis L. es una planta conocida popularmente como cañandonga,
utilizada tradicionalmente para mejorar los estados anémicos. La decocción
de hojas, fruto y corteza se usa por vía oral para tratar la anemia,
hemorragia nasal, enfermedades del hígado, infección urinaria,
histeria, resfrío y tos.3
Es un árbol que mide hasta 30 m de altura con extensas ramas, nativa de Centro América, el Caribe y Norte de Sudamérica.
Los estudios de caracterización química del polvo seco del fruto
demostraron la presencia de esteroides y terpenos, aceites esenciales, azucares
reductores, aminoácidos, aminas, saponinas, glicósidos y polisácaridos.
También se detectó minerales tales como potasio, magnesio, cobalto,
hierro y níquel (Águila Y. Caracterización de una materia
prima con propiedades antianémica, a partir de un producto natural. Tesis
de Licenciado en Farmacia. Instituto de Farmacia y Alimentos, Universidad de
la Habana, 1999).
Sustancia de ensayo. La Cassia grandis L. Se identificó
con el número de herbario 4 296 de la Estación Experimental "Juan
Tomás Roig". Los frutos de Cassia grandis L. Se colectaron
en Bayamo, provincia Granma; estos se limpiaron y se despojaron de su vaina,
para ser secados y molidos hasta la obtención de un polvo fino y seco,
envasados en bolsas de nylon selladas e identificadas para su almacenaje a temperatura
ambiente en lugar seco.
Animales de experimentación. Se utilizaron ratas Wistar machos
procedentes de la colonia del Laboratorio de Investigaciones Biológicas
del Centro de Investigaciones y Desarrollo de Medicamentos (CIDEM), con una
masa corporal comprendida entre 250 y 300 g, que se mantuvieron en una sala
con temperatura controlada de 22 ± 2 oC,
lecho de viruta con cambio cada 48 h y ciclos de luz-oscuridad de 12 x 12 h.
Procedimiento. Todos los animales fueron sometidos durante 15 días
a una dieta semisintética deficiente en hierro y extracciones de 2,5
mL de sangre del plexo ocular 3 veces por semana, hasta provocar estados anémicos
en los animales con contenido de hemoglobina en sangre menores de 9 g/dL.
La dieta semisintética formulada estuvo compuesta por: caseína
15 %, harina de soya 2,5 %, gelatina 2,5 %, almidón de papas 15 %, almidón
de maíz 20 %, celulosa en polvo 5 %, aceite de girasol 5 %, sacarosa
30 %, DL-metionina 0,3 %, mezcla de vitaminas y minerales 4,5 % (sales libres
de hierro), bitartrato de colina 0,2 %. El análisis de la dieta mostró
un contenido de hierro de 0,15 mg/100g (aportado por la harina de soya presente
en la dieta de depleción elaborada).
Una vez alcanzado el estado de anemia, los animales se distribuyeron al azar
en 3 tratamientos con 5 animales cada uno: 1) dieta semisintética, 2)
dieta semisintética suplementada con 15 mg de hierro/ kg de dieta, 3)
dieta semisintética suplementada con 15 mg de hierro/kg de dieta y 750
mg/kg de peso corporal de polvo seco de Cassia grandis L.
La fuente de hierro utilizada fue el sulfato ferroso mezclado en la dieta,
y el polvo de Cassia grandis L. se administró en forma de suspensión
en carboximetilcelulosa al 0,5 % con cánula intragástrica, durante
15 días.Transcurrido el tiempo de tratamiento, los animales se anestesiaron
para la extracción de sangre del plexo ocular con vistas a determinar
el volumen celular, la concentración de hemoglobina mediante el método
de cianometahemoglobina7 y el contenido de
hierro en plasma según la técnica descrita por Pardo y
otros.8
Los resultados obtenidos se procesaron estadísticamente mediante un
análisis de varianza de una vía de clasificación y posteriormente
por un análisis de Duncan.9
Los valores medios de hemoglobina al cabo de los 15 días de tratamiento
fueron significativamente diferentes en los 3 grupos experimentales, con resultados
mayores en el grupo suplementado con hierro y Cassia grandis. En este
grupo también se observó un incremento significativo de los valores
medios de hierro en plasma en relación con los valores obtenidos en los
animales no suplementados y en los animales que recibieron solamente hierro
en la dieta.
Los valores medios de hematócrito y hemoglobina de los animales sometidos
durante 15 días a una dieta de depleción de hierro se presentan
en la tabla, al igual que los valores medios de estos indicadores en los animales
tratados con Cassia grandis L. y/o sulfato ferroso durante otros 15 días.
TABLA. Valores medios ( ±
DE) de hemoglobina (Hb), hematócrito (Hto) y hierro (Fe) en plasma de
ratas suplementadas con hierro con polvo seco de Cassia grandis L. o sin él
(inicio y al final de los 15 días de tratamiento)
|
Tratamientos
|
Inicio
Hb g/dL |
Inicio
% Hto |
Final
Hb g/dL |
Final
% Hto |
Fe-plasma final
mg/100 mL |
| Dieta sin suplementar (control) |
6,72 ± 0,60
|
34 ± 2,5
|
6,79 ± 1,18a
|
49 ± 4,2
|
2,83 ± 0,91a
|
| Dieta + Fe 15 mg/kg de dieta |
6,76 ± 0,66
|
32 ± 2,7
|
10,65 ±1,54b
|
52 ± 4,5
|
3,17 ± 0,66a
|
| Dieta + Fe 15 mg/kg de dieta + Cassia 750 mg/kg de peso corporal |
6,82 ± 0,65
|
32 ± 4,5
|
14,06 ±0,82c
|
48 ± 5,5
|
4,7 ± 0,30b
|
| Significación |
NS
|
NS
|
p< 0,01
|
NS
|
p< 0,01
|
Letras desiguales difieren significativamente p< 0,01
El contenido de hierro en plasma de los animales suplementados solo con hierro
no mostró diferencia significativa en relación con el grupo sin
suplementar. Sin embargo, la administración de Cassia grandis
L. al grupo que consumía la dieta con hierro provocó un incremento
de los valores medios de hemoglobina y de hierro en plasma, a pesar de que la
cantidad de hierro presente en la dieta se encontraba por debajo de los requerimientos
(0,5 mg/día, equivalente a 25 mg/kg de dieta ) reportados para la especie.10
Los animales de todos los grupos experimentales al final del tratamiento, lograron
alcanzar valores normales de hematócrito establecidos para la especie
(45-52 %),10, 11 sin presentarse diferencias
significativas entre ellos.
Es conocido que el hierro es indispensable para la formación de hemoglobina,12,
13 pero no es el responsable fundamental de la formación de los
eritrocitos, por lo que este último proceso puede no afectarse y continuar
la producción de eritrocitos con bajo contenido de hemoglobina, anemia
micrócitica hipocrómica, alcanzando rápidamente valores
de hematócrito dentro de los rangos normales reportados.10,
11
También se debe señalar que el estado anémico se alcanzó
con una dieta de depleción de hierro conjuntamente con una hipovolemia,
y que ante este fenómeno, el organismo tiene una respuesta rápida
en la formación de células rojas lograda por un incremento en
la eritropoyesis.13 En las ratas se plantea
una velocidad de regeneración para la hemoglobina de 10 g en 6 semanas,
con una disponibilidad real de hierro de 0,25 mg/día en la dieta.
Como se planteó anteriormente, el hierro es un elemento fundamental
en la formación y composición de la hemoglobina y en nuestro experimento
se pudo observar que la administración de Cassia grandis
L. favorece tanto el incremento de los niveles de hierro en plasma, como la
formación de hemoglobina en los eritrocitos, así se corrobora
los efectos beneficiosos de la planta en los estados anémicos experimentales.
Algunos investigadores plantean que el hierro en estado trivalente puede ser
ampliamente absorbido si este se encuentra formando parte de complejos estables
a la acción gástrica,4, 14, 15
por lo que sería interesante valorar la función que desempeña
el producto o algunos de sus componentes en este caso. Otros señalan
que el valor terapéutico de los compuestos de hierro depende fundamentalmente
de la disponibilidad de hierro para su absorción, con excepción
de los compuestos liposolubles que pueden atravesar la mucosa, independientemente
del sistema de transporte para el hierro.4
Los resultados del presente trabajo indican que el polvo seco de Cassia grandis L. incide en una mejor utilización del hierro presente en la dieta, aun cuando este se encuentra por debajo de los requerimientos establecidos para la especie. Todo lo anterior hace pensar en una mayor absorción de hierro y/o movilización de la reserva, depositada en los tejidos en forma de ferritina y hemosiderina, así como una estimulación de la actividad de transferina que interviene en la movilización del hierro de depósito o bien en un efecto antioxidante que aumente la biodisponibilidad y/o absorción de hierro ferroso utilizable por la células.6
The population of the eastern zone of Cuba refers to the benefitial effects
of the traditional use of Cassia grandis L. in anemia by using dry powder
obtained from the fruit as a nutritional supplement. The objective was to evaluate
this effect in an experimental model of iron-deficiency anemia in rats, induced
by successive blood extractions and the administration of an iron-lacking diet.
All the animals were on a semisynthetic iron-deficiency diet and blood was extracted
3 times a week until attaining haemoglobin concentrations in blood under 9 g/dL.
They were divided into 3 groups on the same diet: group I with no supplement,
group II supplemented with 15 mg of iron/kg of diet, and group III the same
amount of iron plus 750 mg/kg of body weight of dry powder of Cassia grandis
L. for other15 days. At the end, the concentrations of iron, hemoglobin and
hematocrit in blood were determined. The mean concentrations of hemoglobin 15
days after treatment were sigificantly different in the 3 experimental groups
with better results in the group that was supplemented iron and Cassia grandis
L. In this group, it was observed a marked increase of the mean values of iron
in plasma compared with the values obtained in the non-supplemented animals
and in the animals that received only iron in the diet. The hematocrit percentage
did not show any significant difference between treatments. The results corroborated
the popular and traditional use of Cassia grandis L.in the anemic states
on improving the utilization of iron and the production of hemoglobin.
Key words: Cassia grandis L., rats, anemia, hemoglobin, iron, animal mode.
Recibido: 14 de mayo de 2004. Aprobado: 21 de junio de 2004.
Dra. Juana Tillán Capó. Centro de Investigación
y Desarrollo de Medicamentos. Ave 26 No. 1605 entre Boyeros y Puentes Grandes,
municipio Plaza de la Revolución, CP 10 600, Ciudad de La Habana, Cuba.
1Doctora
en Ciencias Veterinarias.
2Master en Ciencias.
3Licenciado en Ciencias Farmacéuticas.
4Técnico en Control de Procesos
Biológicos.