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Rev Cubana Hematol Inmunol Hemoter 1998;14(2):97-100
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Instituto de Hematología e Inmunología Ciudad de La Habana

Fenotipos débiles del antígeno A (sistema ABO de grupos sanguíneos) en donantes de sangre

Dra. Reneé González Sampedro, Lic. Antonio Bencomo Hernández, Lic. Yalile Alfonso Valdés, Lic. Marta Martínez Solís y Lic. René Rivero Jiménez

Resumen

El grupo sanguíneo A se subdivide en los subgrupos A1 y A2, sobre la base del número de sitios antigénicos A sobre la superficie del hematíe. Además se han descrito otros fenotipos débiles de este antígeno. Para la determinación de éstos se utilizó la técnica de hemaglutinación con antisueros policlonales y en los casos de aglutinación débil, tardía o de discrepancias con el grupo reverso, se realizó ésta con antisueros anti-A1 y anti-H. Se estudiaron 6 346 donantes de sangre del Banco Municipal "10 de Octubre" durante 5 meses del año 1996: 48,79 % fueron del grupo O, 35,15 % del A, 12,20 % del B y 3,58 % del AB. Catorce donantes (0,22 %) resultaron A2B, 2 (0,03 %) A2BHw, 1 Ael (0,01 %) y 1 Aint (0,01 %). Las células con estos subgrupos se utilizaron en la confección de un panel para evaluar un anticuerpo monoclonal anti-A producido en el Instituto de Hematología e Inmunología.

Descriptores DeCS: SISTEMA DEL GRUPO SANGUINEO ABO/diagnóstico; GRUPOS SANGUINEOS.

Los grupos sanguíneos son antígenos presentes en un gran número en la superficie de los eritrocitos. Su extructura química consiste en carbohidratos de proteínas y glicolípidos. 1

Los genes A y B codifican a las tranferasas A y B (glicosiltransferasas), las que transfieren N acetilgalactosa y galactosa, respectivamente al mismo sustrato, el antígeno H.

El gen O es inactivo (debido posiblemente a un fallo estructural más que a un fallo de la expresión de las transferasas A o B),por lo que este antígeno queda sin modificación. El locus genético para el sistema ABO se identificó en el cromosoma 9 (q34) por estudios familiares y de genética celular. La transferasa A fue clonada. Se determinó la secuencia de sus nucleótidos y se identificó como una proteína que atraviesa la membrana con un segmento hidrofóbico posiblemente transmembranoso y un dominio catalítico carboxilo terminal.2

El grupo sanguíneo A presenta los subgrupos A1 y A2. El subgrupo A2 presenta una expresión antigénica débil y las personas con los fenotipos A2 y A2B pueden tener anticuerpos anti-A1.1

Además se han descrito subgrupos raros del antígeno A con características serológicas específicas como el A3, A4, A5, Ax, Ao, Am, Aend, Abantu, Alae y el Ael. También se conoce el tiempo intermedio del grupo sanguíneo A (Aint), que es una variante del subgrupo A2 y que reacciona con las lectinas Ulex europeus y Dolichos biflorus.3

Entre los genes de las transferasas A1 y A2 se identificaron 2 diferencias estructurales: sustitución del aminoácido (aa) prolina en A1 por leucina en A2 en el aa 156 y deleción de una base simple que se encuentra cercana al carboxilo terminal, uno de los 3 residuos C en los nucleótidos 1959-1061, las cuales se han encontrado en todos los subtipos A2 analizados. Los alelos A3 y Ax presentan sustituciones de un solo aa, pero en el gen A3 no aparece siempre, lo que indica heterogeneidad en los sugrupos al nivel molecular.2

En este trabajo se presenta la incidencia de fenotipos débiles del grupo sanguíneo A encontrados en donantes de sangre.

Métodos

Se estudiaron todos los donantes (6 346) concurrentes al Banco de Sangre Municipal "10 de Octubre", a las unidades móviles y al centro de extracción de Arroyo Naranjo, durante los meses de marzo a julio de 1996.

A todos las muestras, obtenidas por venipuntura, se les realizó la técnica de hemaglutinación en láminas portaobjetos, según las Buenas Prácticas de Laboratorio.4,5

Se emplearon reactivos hemoclasificadores policlonales humanos anti-A, anti-B y anti-AB (MediCuba, La Habana).

En cada caso se realizó la prueba serológica para identificar paralelamente los anticuerpos (isoaglutininas) presentes en el suero de la muestra, los cuales se corresponden con él o los antígenos ausentes.

En los casos en los que se observó aglutinación débil, tardía o discrepancias entre el anti-A y anti-AB o con la prueba serológica, se aplicó la técnica de hemaglutinación en tubo de ensayo y con los reactivos hemoclasificadores anti-A1 y anti-H, a veces nombrado anti-A2. Las células AB que aglutinan con el anti-H y no lo hacen con el anti-A1 son A2B. Cuando no aglutinan con el anti-A1 ni con el anti-H, las células son A2B con deficiencia de H (A2BHw).6

Todas las muestras discrepantes se verificaron y se caracterizaron en el Instituto de Hematología e Inmunología (IHI). El Ael y el Aint se determinaron según Race y otros.7

A la población estudiada se le aplicó el principio de Hardy y Weinberg. Se calcularon las frecuencias genotípicas esperadas a partir de las encontradas para los grupos ABO.8

Resultados

Los fenotipos encontrados se muestran en la tabla.
Tabla. Grupos sanguíneos ABO y fenotipos débiles del antígeno A en donantes de sangre
Donantes: 6 346
Grupo sanguíneo
%
3 096
O
48,79
2 231
A
35,15
774
B
12,20
227
AB
3,58
14
A2B
0,22
2
A2BHw
0,03
1
Ael
0,01
1
Aint
0,01
De todos los donantes de sangre AB (243), el 93,42 % fueron A1B, el 5,76 % A2B y el 0,82 % y A2BHW.

De los donantes del grupo A ( 2 230), 1 (0,045 %) fue Ael y 1 (0,045 %) fue Aint. Además se detectó un A1 con un anticuerpo anti-M.

Las frecuencias génicas fueron: PA = 0,22, qB = 0,08 y rO = 0,70, lo que indica que esta población se encuentra en equilibrio genético.

Discusión

Las frecuencias encontradas en los grupos sanguíneos son similares a las observadas en otros estudios realizados en donantes de sangre de Cuba.9,10 Como en este trabajo no se enfrentaron todas las muestras a los reactivos hemoclasificadores anti-A1 y anti-H, no se pudo clasificar separadamente al antígeno A en A1 y A2, por lo tanto, se investigaron solamente los fenotipos más débiles.

Debido a que la definición de los fenotipos débiles del antígeno A depende del reactivo hemoclasificador y la gran mayoría de estos fenotipos se encuentran en el subgrupo A2B, éstos se detectaron casi siempre al presentar una aglutinación muy escasa o nula con el reactivo anti-A y la reacción evidente con el anti-AB. Sin embargo, no necesariamente se reflejó la frecuencia de este grupo en la muestra estudiada, ya que debido a la gran variación del antígeno A en dicho fenotipo, algunos A2B tal vez no se discriminaron al no reaccionar débilmente frente a los reactivos utilizados.

A partir de este subgrupo, fue posible identificar los fenotipos con aglutinabilidad más débil, pues no reaccionaron con el anti-A y en el caso del Ael fue incluso necesario realizar el estudio familiar y en la saliva para poderlo clasificar.7

En el tipo Aint encontramos que en ocasiones se parecía al A1, pero con una reacción mucho más débil frente al anti-A y con una reacción fuerte con el reactivo anti-H, aunque no tanto como la encontrada con las células A2. Se ha comunicado el cuidado que hay que observar cuando se trabaja con estos tipos, ya que la expresión de sus receptores puede fluctuar y aparecer como un A1.3

Aunque se conoce que el subgrupo A2B y otros fenotipos débiles del grupo sanguíneo A son más frecuentes en individuos de la raza negra, en este estudio no se consideró este aspecto, debido a que no se utilizaron muestras seleccionadas y analizadas de acuerdo con los parámetros antropológicos establecidos. La población cubana está constituida por una mezcla genética heterogénea, la cual se observa aún en los grupos extremos con características negroides o caucasoides bien definidas,11 por lo que no es posible establecer las etnias por el color de la piel sin cometer errores en la clasificación.

Todos los subgrupos hallados se incluyeron en un panel celular y se utilizaron en la evaluación de un anticuerpo monoclonal anti-A generado en el IHI.12

Agradecimientos

Agradecemos la colaboración del personal del Banco de Sangre Municipal "10 de Octubre" y del Departamento de Inmunohematología del IHI.

SUMMARY

Blood group A is divided into subgroups A1 and A2 on the basis of the number of antigenic sites A on the surface of the erythrocyte. Other weak phenotypes of this antigen have also been described. To determine them it was used the hemoagglutination with polyclonocal antisera and in the cases of weak or late agglutination or of discrepancies with the reverse group anti-Al anti-H antisera were utilized. 6346 blood donors from the "10 de Octubre" Municipal Blood Bank were studied during 5 months in 1996; 48.79 % were from group O, 35.15 % from group A, 12.20 % from group B and 3.58 % from group AB.14 blood donors (0.22 %) proved to be A2B, 2 (0.03 %) A2BHw, and 1 A el (0.01 %). The cells with these subgroups were used to make a panel in order to evaluate an anti-A monoclonal antibody produced at the Institute of Hematology and Immunology.

Subject headings: ABO BLOOD-GROUP SYSTEM/diagnosis; BLOOD GROUPS.

Referencias Bibliográficas

  1. Stites DP, Stobu JD, Fundenberg HH, Wells JV. Inmunología básica y clínica. 5 ed. La Habana: Editorial Científico-Técnica, 1982:648-94.
  2. Yamamoto FI. Review: recent progress in the molecular genetic study of the histo-blood group ABO system. Immunohematology 1994;10:1-7.
  3. Prokop O, Gohler W. Blood groups. Montreal, 1986:22-5.
  4. Organización Panamericana de la Salud. Manual de procedimientos de control de calidad para los laboratorios de serología de los bancos de sangre, Washington DC, 1994:38-9.
  5. Grupo Nacional de Hematología y Banco de Sangre. Procederes de banco de sangre. La Habana, 1989:43-9.
  6. Widmann FK. Technical manual. 8 ed. Washington DC: JB Lippincolt, 1981:109.
  7. Race RR, Sanger R. Blood groups in man. 6 ed. Oxford: Blackwell Sci, 1975:17-9.
  8. Jenkins JB. Genética. La Habana: Editorial Científico-Técnica, 1982:684-94.
  9. Bencomo A, Alfonso Y, Alfonso ME, González R, Fernández J, Ballester A. Frecuencia de los grupos sanguíneos A1, A2, Aint, Ael, B y O en donantes de sangre. Rev Cubana Hematol Inmunol Hemoter (en prensa).
  10. González C. Microtécnica para la determinación de los grupos sanguíneos ABO y Rho (D). Rev Cubana Hematol Inmunol Hemoter 1989;5:110-3.
  11. González R, Ballester JM, Estrada M, Lima F, Martínez G, Wade M, et al. A study of the genetical structure of the Cuban population: red cell and serum biochemical markers. Am Hum Genet 1976;28:585-96.
  12. Rivero RA, Suárez LE, Bencomo A, González R, González JM, Palma LE, et al. Generación de un hibridoma de ratón secretor de anticuerpos monoclonales contra el antígeno A del sistema ABO. Biotecnol Aplicada 1995;12:23-9.
Recibido: 14 de febrero de 1997. Aprobado: 26 de septiembre de 1997.
Dra. Reneé González Sampedro. Instituto de Hematología e Inmunología. Apartado 8070, CP 10800, Ciudad de La Habana, Cuba.
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