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Rev Cubana Plant Med 2003; 8(3)

Artículos Originales

Estación Experimental de Plantas Medicinales "Dr. Juan Tomás Roig". Centro de Investigación y Desarrollo de Medicamentos

Obtención y control de calidad de la tintura homeopática de Passiflora incarnata L.

MSc. Dinah García,1 Téc. Maritza Crespo2 y Téc. Carlos A. Rodríguez Ferradá3

Resumen

Con el objetivo de incrementar el arsenal de tinturas madres elaboradas a partir de plantas cultivadas en las condiciones de Cuba, se obtuvo la tintura de Passiflora incarnata L., según el método de la escuela francesa; a un título de etanol del 65 % y se establecieron indicadores de calidad tales como: características organolépticas, imagen capilar, índice de refracción, densidad relativa, pH, título etanólico y porcentaje de residuo seco. Se realizaron reacciones de identificación para determinar la presencia de fenoles, flavonoides y alcaloides y fue estandarizado por cromatografía en capa fina un perfil de la tintura. Los indicadores de calidad en todos los lotes obtenidos, se encontraron dentro de los límites establecidos por las farmacopeas tomadas como referencias. Se realizó un estudio de estabilidad para determinar el tiempo de vida útil de la tintura por un año a temperatura ambiente en frascos de vidrio de color ámbar de 30 mL. Se pudo comprobar que en estas condiciones, la tintura conservó de forma óptima sus características, además, el conteo microbiano de la misma se mantuvo por debajo de los niveles permisibles durante todo el experimento. Estos resultados demostraron que es realmente posible obtener esta tintura en Cuba con una calidad similar a la exigida por farmacopeas homeopáticas oficiales.

DeCS: PASIFLORA INCARNATA; TINTURAS/farmacología; FARMACOTECNICA HOMEOPATICA; VENCIMIENTO DE LOS MEDICAMENTOS; TINTURA MADRE; CUBA.

Passiflora incarnata L., es una especie muy empleada en la terapéutica alopática desde hace muchos años y que tiene también gran utilidad en la homeopatía, fundamentalmente en el tratamiento del insomnio,1 aunque de igual forma se utiliza como antiespasmódico, en el tratamiento de la adicción a drogas como la morfina, convulsiones en niños y neuralgias, entre otras afecciones.2

Para incrementar el arsenal de tinturas madres obtenidas a partir de plantas cultivadas en las condiciones de Cuba, los autores se propusieron establecer el método para su obtención descrito en farmacopeas homeopáticas oficiales,3-5 y valorar los indicadores de calidad fundamentales comparándolos con los ya establecidos en estas farmacopeas.

Métodos

En este trabajo se utilizaron las partes aéreas de Passiflora incarnata L., tomadas al comienzo de la floración de plantas cultivadas en la Estación Experimental de Plantas Medicinales "Dr. Juan Tomás Roig", ubicada en el municipio San Antonio de los Baños de la Provincia Habana, Cuba. Una muestra del material empleado fue depositada en el herbario de la citada estación y registrada con el número 4587.

Se obtuvieron 9 lotes de tintura según el método de la escuela francesa correspondientes a 9 cosechas diferentes, en una relación 1/10 y a un título de etanol del 65 %.3,4

Para controlar la calidad de la tintura se realizaron reacciones de identificación con la finalidad de comprobar la presencia de diferentes metabolitos secundarios, tales como la reacción con el cloruro férrico característica de compuestos fenólicos descrita en las farmacopeas,3,4 además de la reacción de Shinoda para determinar compuestos flavonoides y las pruebas con reactivos precipitadores de alcaloides (Dragendorff y Wagner).6 Se determinaron otros indicadores de calidad como índice de refracción, densidad relativa, pH, título de etanol y residuo seco, los 2 últimos con el fin de establecer las condiciones óptimas en el método de obtención de esta tintura madre.

Se estandarizó el perfil de la tintura mediante cromatografía en capa delgada, utilizando placas precubiertas de sílica gel G 60 de 0,25 mm de espesor de capa, como sistema de solvente se aplicó una mezcla de acetato de etilo: metil etil cetona: agua: ácido fórmico anhidro (5: 3: 2: 1) y como reveladores, luz ultravioleta de 365 nm y el reactivo citrobórico.

Con el objetivo de determinar el tiempo de vida útil, se realizó un estudio de estabilidad en los lotes 1,2 y 3 (tabla 1) almacenados a temperatura ambiente en frascos de color ámbar de 30 mL, con tapas de baquelita y retapas de polipropileno. Se llevaron a cabo 5 evaluaciones, al inicio del experimento y después cada 3 meses hasta completar el año al término del cual, se determinaron los mismos indicadores que formaron parte del control de calidad de la tintura, se realizó, además, un control microbiano al inicio y cada seis meses según los medios y métodos descritos en la USP XXII (Determinaciones de límites microbianos de medicamentos no estériles)7 y en la norma cubana basada en esta farmacopea.8 Este control incluyó: conteo total de bacterias y hongos, evaluaciones cuantitativas de enterobacterias y de Escherichia coli, Salmonella sp, Pseudomonas aeruginosa y Staphylococcus aureus.

Resultados

La tintura obtenida tenía un aspecto transparente, sin presencia de partículas ni separación en capas, de color verde parduzco y olor fuerte desagradable característico de la droga. Estos resultados coincidieron con los que establecen las farmacopeas utilizadas como referencias.3-5

En todos los lotes las características organolépticas de la tintura fueron similares.

La tintura posee una imagen capilar alta, de color crema verdoso, destacándose en la parte superior de la sub-banda una zona de color amarillento. La franja es ligeramente festonada. A la luz ultravioleta, por debajo de la franja, se presenta una fluorescencia amarilla superpuesta a una azul. El resto de la imagen posee una coloración púrpura y fue de color rojo más intenso la zona amarilla de la sub-banda. Con vapores de amoníaco al visible la imagen se torna amarillo verdosa y al UV se intensifica la fluorescencia azul, el resto de la sub-franja y la banda tomaron coloración pardo amarillenta, la parte superior de la sub-banda, rojo naranja y el resto pardo verdosa.

Todos los lotes respondieron positivamente a las pruebas de identificación exigidas por las monografías utilizadas, en el caso de la reacción de Shinoda se observó para los 9 lotes la formación de una intensa coloración roja, muy característica de compuestos flavonoides, de igual forma con los reactivos de Dragendorff y Wagner se obtuvo abundante precipitado color naranja y pardo rojizo respectivamente, que denotaron la presencia de alcaloides en la tintura.

En la tabla 1 se ofrecen los valores de los indicadores físicos, fisicoquímicos y químicos determinados. Los valores de índice de refracción, densidad relativa y pH mostraron poca variación de un lote a otro y los porcentajes de residuo seco y título de etanol en todos los casos se encontraron dentro de los límites de valores aceptados.3-5

Tabla 1. Indicadores determinados a la tintura de Passiflora incarnata L.

Lote
Índice de refracción
Densidad relativa
pH
Residuo seco (%)
Título de etanol (%)
1
1,361
0,898
5,9
2,17
60,90
2
1,361
0,893
5,9
2,20
66,39
3
1,361
0,891
6,0
2,18
64,72
4
1,362
0,891
5,5
2,91
64,72
5
1,361
0,893
5,4
2,53
64,55
6
1,361
0,893
5,4
2,65
64,55
7
1,363
0,891
5,6
3,39
64,55
8
1,363
0,892
5,5
3,93
63,63
9
1,363
0,894
5,6
3,96
66,38
Valor publicado
-
-
-
³ 1,203,4,8
60-703,4


El perfil cromatográfico de la tintura revelado con luz ultravioleta, mostró 15 bandas fundamentales (Fig.), al atomizar con el reactivo citrobórico, a la luz ultravioleta las bandas pardas exhibieron un color amarillo verdoso.

Fig. Perfil cromatográfico de la tintura de Passiflora incarnata L. revelado al UV.

Durante el estudio de estabilidad, la tintura conservó sus propiedades organolépticas, así como las características de la imagen capilar, igualmente presentó similar comportamiento en las reacciones de identificación realizadas. El perfil cromatográfico mostró el mismo número de bandas, e idéntica respuesta frente a los sistemas de detección utilizados, sin que fueran notados cambios en cuanto a la aparición de nuevas bandas o a la desaparición de las ya detectadas. Los valores de índice de refracción, densidad relativa y pH permanecieron prácticamente invariables, así como los porcentajes de sólidos totales y título de etanol, permanecieron dentro de los límites permisibles3-5 en el transcurso del año (tabla 2). De igual forma el conteo microbiano se mantuvo por debajo del límite máximo establecido.

Tabla 2. Indicadores evaluados a Passiflora incarnata L. durante el estudio de estabilidad

Índice de refracción
Lote
Inicio
1ra.
2da.
3ra.
4ta.
1
1,361
1,361
1,361
1,361
1,361
2
1,361
1,362
1,362
1,362
1,362
3
1,361
1,362
1,361
1,362
1,361
Densidad relativa
Lote
Inicio
1ra.
2da.
3ra.
4ta.
1
0,898
0,898
0,892
0,898
0,898
2
0,893
0,893
0,891
0,893
0,894
3
0,891
0,891
0,891
0,891
0,892
PH
Lote
Inicio
1ra.
2da.
3ra.
4ta.
1
5,9
5,9
5,9
5,9
5,9
2
5,9
5,9
5,9
5,9
5,9
3
6,0
5,9
5,9
5,9
6,0
Residuo seco (%)
Lote
Inicio
1ra.
2da.
3ra.
4ta.
1
2,17
2,21
2,01
2,17
2,13
2
2,20
2,08
2,02
2,20
2,17
3
2,18
2,16
2,02
2,20
2,16
Título de etanol (%)
Lote
Inicio
1ra.
2da.
3ra.
4ta.
1
60,90
60,82
62,72
61,81
62,72
2
66,39
68,24
63,63
61,81
61,81
3
64,72
66,38
64,55
64,55
64,55

Discusión

Se tomó la decisión de incluir los ensayos de identificación de compuestos flavonoides y alcaloides en la tintura, con el propósito de enriquecer el control de calidad, ya que se conoce de la presencia de estos metabolitos en esta especie y en otras pertenecientes al género,9,10 hecho que quedó demostrado por la respuesta muy positiva observada en todos los lotes frente a estas pruebas.

Los índices de calidad determinados a la tintura se encontraron dentro de los límites exigidos por las farmacopeas homeopáticas utilizadas como referencia,3-5 lo que demostró que es posible su producción a partir de material vegetal cultivado en las condiciones de Cuba.

Con el estudio de estabilidad se comprobó que la mayoría de los indicadores evaluados se mantuvieron prácticamente invariables en el transcurso de un año. Para el caso del residuo seco, es válido destacar que desde el punto de vista del control de calidad los valores no difieren grandemente y se mantuvieron durante todo el año por encima del límite aceptado (³1,20 %).3-5 También los valores del título etanólico en los tres lotes se encontraron dentro del rango establecido (60-70 %)3,4 y como puede observarse en la tabla 2 no hay grandes diferencias numéricas en este indicador expresado en porcentaje sobre todo en el lote 3.

Los resultados del estudio realizado demostraron que la tintura de Pasiflora incarnata L., puede ser obtenida de plantas cultivadas en las condiciones de Cuba, con una calidad similar a la exigida por farmacopeas homeopáticas oficiales y que la misma puede ser conservada a temperatura ambiente por un año, en frascos de vidrio de color ámbar de 30 mL sin que se afecte su calidad.

Summary

In order to increase the arsenal of mother tinctures made from plants cultivated under the conditions of Cuba , it was of interest to obtain the Passiflora incarnata L., according to the method of the French school, at an ethanol titer of 65 %, and to establish its quality indicators, such as organoleptic characteristics, capillary image, refraction index, relative density, pH, ethanolic titer and percentage of dry residual. Identification reactions were carried out to determine the presence of phenols, flavonoids, and alkaloids, and a dye profile was standardized by thin layer chromatography. The quality indicators in all the obtained batches were within the limits established for the pharmacopoeias taken as references. A stability study was conducted to determine the time of useful life of the tincture during a year at room temperatures in glass amber flasks of 30 mL It was proved that under these conditions the tincture kept its characteristics in an optimal way and that its microbial count was below the permissible levels during the whole experiment. These results show that it is really possible to obtain this tincture in Cuba with a quality similar to that required by official homeopathic pharmacopoeias.

Subject headings: PASSIFLORA INCARNATA; DYES/pharmacology; HOMEOPATHIC PHARMACOTECHNIQUES; DRUG EXPIRATION; MOTHER TINCTURE; CUBA.

Referencias bibliográficas

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Recibido: 11 de diciembre de 2002. Aprobado: 31 de marzo de 2003.
MsC. Dinah García. Estación Experimental de Plantas Medicinales "Dr. Juan Tomás Roig". San Antonio de los Baños. Provincia Habana, Cuba.

1 Máster en Química. Investigadora Auxiliar.
2 Técnico Medio en Tecnología Farmacéutica.
3 Técnico Medio en Agronomía.


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