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SINTEFARMA 1(1), enero-marzo, 1995

ENSAYO DE DISOLUCION Y VALIDACION DEL METODO YODOMETRICO EN LAS CAPSULAS DE AMPICILINA

Ing.José F. Vicens Barroso*
Tec.Carlos Hdez.Coto**

RESUMEN

Se realizó el ensayo de disolución de las cápsulas de ampicilina adecuando el método espectrofotométrico con sulfato de cobre reportado en la Farmacopea Británica del año 1973 para la ampicilina materia prima.

Las determinaciones espectrofometricas se realizaron a 320 nm de acuerdo con lo reportado en las bibliografías para la ampicilina para este método.

Se compara el método yodométrico con el espectrofotometrico, sin que se encuentren diferencias significativas entre muestras ni entre metodos.

Los resultados obtenidos en el ensayo de disolución están por encima del 80 % cumpliendo asi con el criterio de aceptación establecido en la Farmacopea Norteamericana (USP) para las cápsulas recién fabricadas y para los testigos.

* Ingeniero Químico. Especialista Principal en Control de Calidad.
**Técnico Químico. Químico Analista.

INTRODUCCION

El ensayo de disolución constituye un ensayo "in vitro" puramente físico mediante el cual se valora la liberación del medicamento a partir de un producto sólido oral hasta su forma disuelta.

Es a partir del año 1985 que en la USP aparece reportado el ensayo de disolución para las cápsulas de ampicilina, señalando los parámetros a seguir en dicho ensayo, pero no las especificaciones a cumplir para la utilización del método espectrofotometrico válido.

En este trabajo se realizó el ensayo de disolución de las cápsulas de ampicilina trihidratada de acuerdo con los parámetros establecidos en la Farmacopea, se adecuo el método espectrofotometrico con sulfato de cobre para la determinación del porciento de disolución y se verifico que no existen diferencias significativas con el método yodometrico para su posible utilización cuando las condiciones así lo requieran, ya que este ensayo, es una especificación de calidad mas introducido para garantizar la calidad de los medicamentos sólidos orales.

MATERIALES Y METODOS

Las cápsulas de ampicilina utilizadas fueron elaboradas con ampicilina trihidratada de la firma Biochemie-Austria.

De dichas cápsulas se tomaron 10 muestras correspondientes a 10 lotes de producto recién fabricados y 2 testigos, se le realizo el ensayo de disolución con 6 replicas para cada muestra en un Disolutor de cestos ERWEKA DT-6, utilizando como medio de disolución 900 mL de agua desgasificada, a una velocidad de 100 rpm durante 45 min. , determinándose el contenido de principio activo disuelto expresado como porcentaje del contenido teórico o declarado por los dos métodos el espectrofotométrico y yodométrico.

Método Espectrofotométrico:

Se determinó la absorbancia a 320 nm en un espectrofotometro Beckman a la solución de ampicilina tratada con sulfato de cobre a 75 xC durante 30 min. y se calculó el % disuelto mediante la formula siguiente:

       Csr . Vdm . (Abm - Abcv) . 90
%= ------------------------------
        D . Amv . Absr

Donde:

Csr concentración de la solución de referencia ( g/mL)

Vdm Volumen dilución de la muestra tomada del vaso disolutor (mL)

Abm Absorbancia de la muestra

D dosis del medicamento (mg)

Amv alicuota tomada del vaso (mL)

Absr absorbancia de la solución de referencia

Abcv absorbancia de las cápsulas vacías

90 factor matemático para el cálculo

Método Yodométrico:

Se determinó la cantidad de ampicilina disuelta después de realizar la hidrólisis alcalina con la adicion de hidróxido de sodio para provocar la ruptura del anillo beta-lactámico con formación de la sal sódica del ácido peniciloico que reacciona con el yodo añadido en exceso, se valora el yodo residual con tiosulfato de sodio usando almidón como indicador y un ensayo de corrección donde el anillo beta-l c-támico permanece intacto.

Se utilizó la siguiente fórmula, para determinar el % de ampicilina disuelta:

       (Vim - Vam) . F . 900 . 100
% = -------------------------------
           D . Am

donde:

Vim consumo de solución de tiosulfato de sodio en el ensayo de corrección de la porción de ensayo (mL).

Vam consumo de solución de tiosulato de sodio en la valoración de la porción de ensayo (mL).

F factor (mg/mL)

D dosis del medicamento (mg)

Am alicuota tomada de la muestra (mL)

900 volumen del medio de la disolución (mL)

100 factor matemático para el calculo

Se comparan los dos métodos entre si, aplicando un análisis de varianza por bloques al azar de Fischer, con dos fuentes de variación entre métodos y entre muestras con un nivel de significación del 1% y 5% .

RESULTADOS Y DISCUSION

En las tablas I y II se observan los resultados promedios obtenidos de las 6 réplicas por cada método empleado.

Los valores obtenidos por el método espectrofotométrico fluctúan entre 83 y 90 % y para el método yodométrico entre 83 y 88%, estando entre los limites del criterio de aceptación para las cápsulas de ampicilina reportado por la USP, mayor o igual que 80% .

En la tabla III se observan el análisis de varianza por bloques al azar de Fischer con dos fuentes de variación entre métodos y entre muestras.

Se pudo constatar que no existen diferencias significativas entre los dos métodos utilizados ya que la relación Fischer(F) calculada 1,607 es menor que la tabulada 5,12 para el nivel de significación 5% y de 10,6 para el 1% esto nos permite utilizar uno u otros método.

Se analizó la diferencia entre muestras en el modelo estadístico aplicado y obtuvimos que la relación de Fischer (F) tabulada para esta variable fue para un 5% de (3,18) y para 1% de (5,26) y la relación de Fischer (F) calculada 1,498, por lo que no existen diferencias significativas entre ellas para los dos niveles de confiabilidad analizados.

En las tablas IV y V se observan los resultados obtenidos por los dos métodos de ensayos utilizados para 2 lotes de testigos, cumpliendo también el ensayo de disolución.

CONCLUSIONES

1. No existen diferencias significativas entre los métodos comparados.

2. Es posible utilizar el método espectrofotométrico con sulfato de cobre en la evaluación del ensayo de disolución de las cápsulas de ampicilina trihidratada.

3.La tecnología utilizada en la elaboración de las cápsulas de ampicilina está normalizada y cumple con el ensayo de disolución.

4.En caso de imprevistos es posible utilizar el método yodométrico en lugar del espectrofotométrico para la evaluación del ensayo de disolución de las cápsulas de ampicilina.

5.El cumplimiento del ensayo de disolución en los testigos ratifica el tiempo de vigencia establecido para las cápsulas de ampicilina trihidratada.

RECOMENDACIONES

1.Realizar el ensayo de disolución aplicando el método espectrofotométrico siempre que se hagan variaciones en la formulación de las cápsulas de ampicilina.

BIBLIOGRAFIA

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(20) Smith,J.W. et al. Método para la determinación espectrofométrica de la ampicilina. Analyst 92;247 (1967)

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(23) The United States Pharmacopeia. Ed XXI;pag. (XV-XVI) y 1273 Apendice (711)

 

Tabla I: Resultados en % del contenido disuelto de ampicilina de las 10 muestras por el método espectrofotométrico del sulfato de cobre.
Muestra % Disuelto Media % Desviación
Standar
1 2 3 4 5 6 n=6
1 83 86 83 84 85 85 84 1.067
2 89 87 81 88 86 83 86 2.808
3 83 84 85 85 85 84 84 0.728
4 86 86 86 87 86 85 86 0.577
5 83 84 85 82 85 82 84 1.258
6 85 86 84 84 85 84 85 0.745
7 86 90 81 92 91 88 88 3.696
8 89 91 88 92 92 87 90 1.950
9 88 87 85 89 85 89 87 1.674
10 85 81 82 80 83 87 83 2.608

 

Tabla II: Resultados en % del contenido disuelto de ampicilina de las 10 muestras por el método yodométrico del sulfato de cobre.
Muestra % Disuelto Media % Desviación
Standar
1 2 3 4 5 6 n=6
1 83 86 80 84 83 85 84 1.892
2 83 83 82 86 87 85 84 1.795
3 83 83 81 90 85 86 85 2.867
4 85 82 83 87 84 82 84 1.771
5 86 86 85 88 86 85 86 1.000
6 86 82 83 83 84 82 84 1.490
7 82 85 81 84 83 83 83 1.290
8 85 81 80 90 88 90 86 4.027
9 85 89 87 87 90 90 88 1.825
10 85 81 81 80 84 84 83 3.253

 

Tabla III: Análisis de varianza.
Fuentes Variación Suma F tabulada
cuadros G.L Varianza Fc. 5% 1%
Muestras 42 9 4.66 1.498 3.18 5.35
Métodos 5 1 5.00 1.607 5.12 10.6
Error 28 9 3.11 -- -- --
Total 75 19 -- -- -- --

 

Tabla IV: Resultados en % del contenido disuelto de Ampicilina de los dos testigos por el método espectrofotométrico del sulfato de cobre.
Testigo % Disuelto
1 2 3 4 5 6 X
8126091 84 81 82 86 83 88 84 Cumple S1
9067032 84 81 74 84 75 83 80 No cumple S1
82 80 81 86 78 76 80 Cumple S2

 

Tabla V: Resultados en % del contenido disuelto de Ampicilina de los dos testigos por el método yodométrico del sulfato de cobre.
Testigo % Disuelto
1 2 3 4 5 6 X
8126091 81 79 81 84 83 82 82 No Cumple S1
86 83 83 83 87 79 83 Cumple S2
9067032 80 76 75 79 80 81 79 No cumple S1
81 78 83 83 84 87 80 Cumple S2
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